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Qu'est-ce que le stockage à température intermédiaire (STI) ?

Quelle est la température optimale de stockage pour la cryopréservation ?
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16 septembre 2022

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À Tomorrow Bio, nous recherchons en permanence de nouvelles façons d'amĂ©liorer notre procĂ©dure de cryoprotection et de conservation. Les Ă©tapes initiales du processus sont affinĂ©es par les Ă©quipes SST qui fournissent la seule procĂ©dure professionnelle de cryoprotection sur le terrain du corps entier disponible Ă  l'heure actuelle. Des agents cryoprotecteurs de pointe sont dĂ©ployĂ©s pour minimiser les dommages causĂ©s aux cellules pendant le refroidissement. En outre, l'azote liquide fournit un environnement de stockage trĂšs stable pour les patients cryoprĂ©servĂ©s. 

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MalgrĂ© tous ces efforts, de nouveaux travaux scientifiques pourraient rĂ©vĂ©ler de nombreuses façons d'amĂ©liorer la cryoprĂ©servation. L'un des points Ă  considĂ©rer est la maniĂšre dont les patients cryoprĂ©servĂ©s sont actuellement stockĂ©s. DĂ©couvre pourquoi c'est le cas et quelle pourrait ĂȘtre la solution proposĂ©e dans cet article.

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Quelle méthode de stockage est actuellement utilisée ?

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Actuellement, la plupart des personnes cryoprĂ©servĂ©es sont stockĂ©es dans de l'azote liquide Ă  une tempĂ©rature de -196°C. Cette mĂ©thode peu coĂ»teuse et durable n'utilise pas d'Ă©lectricitĂ© et est assez facile Ă  entretenir, de nouvelles rĂ©serves d'azote liquide ne devant ĂȘtre ajoutĂ©es qu'une fois par semaine. Quel est donc le problĂšme ?

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Lors de la cryopréservation, les patients entrent dans un état de vitrification à une température d'environ -130°C. Il s'agit d'un état vitreux. Il s'agit d'un état semblable à du verre. AprÚs cet événement, ils sont lentement refroidis davantage jusqu'à -196°C, la température naturelle de l'azote liquide, à partir de laquelle leur température corporelle restera statique. 

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Le problÚme ne réside pas dans le stockage à long terme, mais plutÎt dans ce qui se passe avant et aprÚs.

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Une température de -196°C n'assure pas (de maniÚre pertinente) une meilleure conservation qu'une température de -130°C. Il se trouve que l'azote liquide possÚde une température avec laquelle la cryopréservation peut fonctionner. En fait, il serait plus pratique pour notre cause que la température de l'azote liquide soit plus proche (mais toujours inférieure) du point de transition vitreuse. 

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Lors d'un stockage rĂ©gulier, un refroidissement uniforme minimise les contraintes thermiques du tissu lorsqu'il passe sous la tempĂ©rature de vitrification. Le stress peut ĂȘtre encore diminuĂ© en maintenant la tempĂ©rature prĂšs du point de transition vitreuse pendant un certain temps peu aprĂšs la vitrification. Cela permet une plus grande relaxation du stress avant que le corps ne soit refroidi davantage.

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Le processus de refroidissement Ă  cette tempĂ©rature trĂšs basse provoque la fracture des tissus, entre autres types de dommages que nous essayons d'Ă©viter. Les lĂ©sions de ce type n'empĂȘchent pas nĂ©cessairement la prĂ©servation d'informations neuroanatomiques cruciales, mais elles compliquent la future rĂ©cupĂ©ration.

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Dessin d'un homme représentant Emil Kendziorra regardant un dewar de stockage
Tomorrow Bio ne propose actuellement que la cryopréservation du corps entier à -196°C.

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Pourquoi le refroidissement endommage-t-il les tissus ?

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Les molécules vibrent, ce qui fait apparaßtre un volume ou une densité typique à une température donnée. Lorsque la température diminue, le volume de l'objet qui y est exposé diminue également. Ce phénomÚne est appelé "contraction thermique".

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Lorsqu'un objet se vitrifie, son intérieur plus chaud se refroidit plus rapidement que son enveloppe extérieure, et sa taille diminue un peu plus vite[1]. [Comme l'intérieur et l'extérieur sont attachés l'un à l'autre, cette différence de taille peut provoquer des fractures, endommageant ainsi les tissus.

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Qu'est-ce que le stockage à température intermédiaire ?

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La fracturation peut ĂȘtre rĂ©duite, et potentiellement (presque) Ă©vitĂ©e, en refroidissant lentement jusqu'Ă  la tempĂ©rature de transition vitreuse et en maintenant une tempĂ©rature plus proche du point de vitrification. 

Ce systÚme est appelé "stockage à température intermédiaire", en référence au fait que sa température se situe quelque part entre celle de la vitrification et de l'azote liquide.

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Le stress thermique du tissu est moins important lorsque le refroidissement au-delĂ  de la tempĂ©rature de transition vitreuse est arrĂȘtĂ© plus tĂŽt. Selon des donnĂ©es antĂ©rieures[2], les dommages sont d'autant plus susceptibles de se produire que le tissu a Ă©tĂ© refroidi rapidement. 

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Avantages et défis du stockage à température intermédiaire

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Malgré leurs avantages théoriques, les systÚmes STI ne sont pas couramment utilisés aujourd'hui pour la cryopréservation en dehors des procédures de recherche. Ceci est principalement dû à la pléthore de défis et de complications que la méthode apporte avec elle. 

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Tout d'abord, l'utilisation de systÚmes STI présente un facteur de risque beaucoup plus élevé que le stockage d'azote liquide par immersion, qui est actuellement utilisé. Les dewars traditionnels de stockage à -196°C sont maintenus presque remplis jusqu'en haut, contenant plus de 1000 litres de liquide à l'intérieur. Cette quantité d'azote liquide est suffisante pour assurer la conservation pendant plus d'une semaine, avant qu'un nouveau remplissage ne soit nécessaire. D'autre part, les dewars STI ordinaires, tels que ceux construits par Alcor[3], ne contiennent qu'environ 120 litres d'azote liquide au fond du dispositif de stockage, ce qui est tout au plus suffisant pour 5 jours de stockage à une température de -140°C. 

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En outre, les dewars STI consomment deux fois plus d'azote liquide que leurs homologues plus froids, tout en Ă©tant trois fois moins grands. Tout comme les dewars ordinaires, ils sont Ă©quipĂ©s pour se remplir automatiquement, mais nĂ©cessitent davantage de ressources et de contrĂŽles pour garantir un maintien stable de la tempĂ©rature. Si l'on considĂšre que les fluctuations de tempĂ©rature (potentiellement dommageables) sont plus susceptibles de se produire, les dewars STI s'avĂšrent finalement ĂȘtre une option moins fiable et moins sĂ»re.

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L'élimination de ces inconvénients est possible, mais elle s'accompagne d'une augmentation exponentielle des coûts d'entretien du stockage.

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Conclusion

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En thĂ©orie, le stockage STI permet une cryoprĂ©servation de meilleure qualitĂ©. Cependant, son entretien plus complexe et son coĂ»t plus Ă©levĂ© l'empĂȘchent d'ĂȘtre la meilleure option aujourd'hui. Tomorrow Bio offrira le stockage STIS comme option Ă  ses membres Ă  l'avenir, s'ils souhaitent ĂȘtre prĂ©servĂ©s de cette façon. Pour l'instant, le stockage Ă  l'azote liquide reste l'alternative la plus sĂ»re et la plus abordable, ce qui explique la poursuite de son utilisation standardisĂ©e dans la cryoprĂ©servation.

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